大鼠脑间质细胞DI TNC1

基本信息

中文名称：大鼠脑间质细胞

细胞简称：DI TNC1

细胞别称：DITNC1; DI-TNC1; DI TNC-1

细胞形态：成纤维细胞样

生长特性：贴壁细胞

组织来源：脑

简介：通过用含有SV40 致癌早期区域的 DNA 构建体转染 1 天大的 Sprague-Dawley 大鼠中脑组织原代星形胶质细胞而建立。使用人类 GFAP 启动子（pGFA-SV-Tt）和小鼠磷酸甘油酸激酶启动子（pPGK-neo）影响转录控制。使用 G418 进行克隆。这些细胞在表型上类似于 1 型星形胶质细胞，包括对神经胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的免疫反应和对γ-氨基丁酸（GABA）的β-丙氨酸可抑制的高亲和力摄取机制。α-2-巨球蛋白的产生类似于原代星形胶状细胞中发现的，但转铁蛋白的产生减少。该细胞系已被证明不会产生前脑啡肽 A、半乳糖脑苷脂或表达 04 或 A2B5 表面抗原，这是 2 型星形胶质细胞的典型特征。免疫染色显示 SV40 T 抗原存在于 90%以上的细胞中。

培养方案A(默认)生长培养基：DMEM培养基＋10% FBS（CF-02S/AUS-01S）＋1%P/S

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%；温度：37℃

冻存条件：70% 基础培养基+20%FBS+10%DMSO

液氮保存

传代步骤：1.吸出原培养液；

2.加入2mL左右PBS，轻轻晃动培养瓶润洗细胞,吸出PBS丢弃；

3.加入1mL左右0.25%胰蛋白酶溶液（含EDTA），轻轻晃动培养瓶使之浸润所有细胞；  

4.放入培养箱消化2-3 min，显微镜下看到细胞块中间的细胞明显变圆有间隙时可终止；

5.加入5mL含血清的培养基终止消化，吹打细胞使之脱壁并在液体里反复吹打使细胞尽量呈单颗细胞的悬浮液；

6.收集细胞悬液离心，1000rpm/min 3-5分钟，离心完吸出上清丢弃；

7.加入新鲜培养基，轻轻吹打混匀细胞即可，按比例接种到新培养瓶，补足培养基，拧松瓶盖或使用透气瓶盖进行培养。

传代比例（密度）：1:2

换液频次：2-3/周

特殊情况：

1.若培养瓶或者冻存管出现破碎或漏液情况，及时拍照联系销售反馈，按指导进行进一步处理。若只是外包装破损一般不影响培养瓶和冻存管，请放心使用。

2.显微镜下观察细胞状态。先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。

3.请仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息（如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等)。

4.建议细胞培养传代时，定期拍照并记录细胞生长状态，所拍照将作为后续技术服务依据。