人结肠癌细胞hct116

基本信息

中文名称：人结肠癌细胞

细胞简称：HCT116

细胞别称：HCT116

细胞形态：上皮细胞样

生长特性：贴壁细胞

培养方案A(默认)生长培养基：DMEM＋10% FBS＋1%P/S

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%；温度：37℃

冻存条件：70% 基础培养基+20%FBS（Cell-Box CF-02S/AUS-01S）+10%DMSO

液氮保存

传代步骤：

1.吸出原培养液；

2.加入2mL左右PBS，轻轻晃动培养瓶润洗细胞,吸出PBS丢弃；

3.加入1mL左右0.25%胰蛋白酶溶液（含EDTA），轻轻晃动培养瓶使之浸润所有细胞；

4.放入培养箱消化2-3 min，显微镜下看到细胞块中间的细胞明显变圆有间隙时可终止，全程不要拍打培养瓶；

5.加入5mL含血清的培养基终止消化，吹打细胞使之脱壁并在液体里反复吹打使细胞尽量呈单颗细胞的悬浮液；

6.收集细胞悬液离心，1000rpm/min 3-5分钟，离心完吸出上清丢弃；

7.加入新鲜培养基，轻轻吹打混匀细胞即可，按比例接种到新培养瓶，补足培养基，拧松瓶盖或使用透气瓶盖进行培养。

培养注意事项：

细胞培养时黑点可能会比较多；2.培养时有部分细胞会漂浮死亡，漂浮细胞过多时及时换液清除；

传代比例（密度）：1:3-1:4

换液频次：2-3次/周

收货注意事项：因为细胞贴壁松，常温细胞收货时细胞可能是成团漂浮状态，漂浮细胞离心收集后用新鲜培养基重悬，并吹散，降低细胞密度后接种到新培养皿即可。

参考文献：1. Endosome Targeting meso-Tetraphenylchlorin-Chitosan Nanoconjugates for Photochemical Internalization. Biomacromolecules. 2017 Apr 10

特殊情况：

1.若培养瓶或者冻存管出现破碎或漏液情况，及时拍照联系销售反馈，按指导进行进一步处理。若只是外包装破损一般不影响培养瓶和冻存管，请放心使用。

2.显微镜下观察细胞状态。先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。

3.请仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息（如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等)。

4.建议细胞培养传代时，定期拍照并记录细胞生长状态，所拍照将作为后续技术服务依据。