产品说明

基本信息

中文名称：人食道癌肿瘤细胞

细胞简称：SK-GT-4

细胞别称： SKGT4; SK4

细胞形态：上皮细胞样

生长特性：贴壁细胞

培养方案A(默认)生长培养基：DMEM高糖+10%FBS（Cell-Box AUS-01S）+1%P/S

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%；温度：37℃

冻存条件：70% 基础培养基+20% FBS（Cell-Box AUS-01S）+10%DMSO

液氮保存

传代步骤：

1.吸出原培养液；

2.加入2mL左右PBS，轻轻晃动培养瓶润洗细胞,吸出PBS丢弃；

3.加入1mL左右0.25%胰蛋白酶溶液（含EDTA），轻轻晃动培养瓶使之浸润所有细胞；

4.放入培养箱消化，显微镜下看到细胞块中间的细胞明显变圆有间隙时可终止，全程不要拍打培养瓶；

5.加入5mL含血清的培养基终止消化，吹打细胞使之脱壁并在液体里反复吹打使细胞尽量呈单颗细胞的悬浮液；

6.收集细胞悬液离心，1000rpm/min 3-5分钟，离心完吸出上清丢弃；

7.加入新鲜培养基，轻轻吹打混匀细胞即可，按比例接种到新培养瓶，补足培养基，拧松瓶盖或使用透气瓶盖进行培养。

传代比例（密度）：1:2-1:3

换液频次：2-3次/周

收货注意事项：

（1）收到细胞后先不开瓶盖，请及时核对培养瓶上标注的细胞名称是否与订购的细胞名称一致以及培养瓶是否有破损或漏液异常情况。若没有发现漏液、污染等异常情况，瓶身擦拭酒精后放在培养箱中静置1-2小时稳定细胞状态。镜下观察，有条件的情况下拍照，之后请尽快传代培养。如果当天无法操作，请常温(约25°)放置，第二天及时操作。

（2）收到细胞后若发现存在细胞脱落现象:请将培养瓶中所有培养液收集至离心管，离心(1000rpm，5min)，弃上清，加1ml的0.25%胰酶于离心管中，轻轻吹打，重悬，作用2-3分钟后，加3-6ml完全培养基中止反应。再离心，去上清，加1-3ml完全培养基重悬。仍然贴壁的细胞，按照以上描述的常规方法加入胰酶消化。最后将消化好的脱落细胞和贴壁细胞混合，按比例接种到新的T25培养瓶中即可。

 

培养注意事项：

因为细胞开始生长较慢，前期注意不要过度移动细胞。

 

特殊情况：

1.若培养瓶或者冻存管出现破碎或漏液情况，及时拍照联系销售反馈，按指导进行进一步处理。若只是外包装破损一般不影响培养瓶和冻存管，请放心使用。

2.显微镜下观察细胞状态。先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。

3.请仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息（如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等)。

4.建议细胞培养传代时，定期拍照并记录细胞生长状态，所拍照将作为后续技术服务依据。

产品说明

基本信息

中文名称：人神经母细胞瘤细胞

细胞简称：SH-SY5Y

细胞别称：SHSY-5Y; SH-Sy5y; SK-SH-SY5Y; SY5Y

细胞形态：上皮细胞样

生长特性：贴壁细胞与悬浮细胞同时存在

培养方案A(默认)生长培养基：DMEM＋10% FBS（AUS-01S）＋1%P/S

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%；温度：37℃

冻存条件：70% 基础培养基+20%FBS+10%DMSO

液氮保存

传代步骤：1.吸出原培养液；

2.加入2mL左右PBS，轻轻晃动培养瓶润洗细胞,吸出PBS丢弃；

3.加入1mL左右0.25%胰蛋白酶溶液（含EDTA），轻轻晃动培养瓶使之浸润所有细胞；

4.放入培养箱消化，显微镜下看到细胞块中间的细胞明显变圆有间隙时可终止，全程不要拍打培养瓶；

5.加入5mL含血清的培养基终止消化，吹打细胞使之脱壁并在液体里反复吹打使细胞尽量呈单颗细胞的悬浮液；

6.收集细胞悬液离心，1000rpm/min 3-5分钟，离心完吸出上清丢弃；

7.加入新鲜培养基，轻轻吹打混匀细胞即可，按比例接种到新培养瓶，补足培养基，拧松瓶盖或使用透气瓶盖进行培养。

传代比例（密度）：1:3-1:5

换液频次：3-4天

参考文献：1.Ross RA, et al. Coordinate morphological and biochemical interconversion of human neuroblastoma cells. J. Natl. Cancer Inst. 71: 741-749, 1983. PubMed: 6137586.

 

收货注意事项：

1.收到细胞后先不开瓶盖，请及时核对培养瓶上标注的细胞名称是否与订购的细胞名称一致以及培养瓶是否有破损或漏液异常情况。若没有发现漏液、污染等异常情况，

2.瓶身擦拭酒精后放在培养箱中静置1-2小时稳定细胞状态。镜下观察，有条件的情况下拍照，之后请尽快传代培养。如果当天无法操作，请常温(约25°)放置，第二天及时操作。

3.细胞虽然为贴壁状态但容易聚团，并且生长缓慢，细胞系在酸性条件下表现出更好的生；补液量应较小且相对不频繁。

特殊情况：

1.若培养瓶或者冻存管出现破碎或漏液情况，及时拍照联系销售反馈，按指导进行进一步处理。若只是外包装破损一般不影响培养瓶和冻存管，请放心使用。

2.显微镜下观察细胞状态。先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。

3.请仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息（如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等)。

4.建议细胞培养传代时，定期拍照并记录细胞生长状态，所拍照将作为后续技术服务依据。

产品说明

基本信息

中文名称：人卵巢癌细胞

细胞简称：CoC1

细胞形态：淋巴母细胞样

生长特性：悬浮细胞

组织来源：卵巢

培养方案A(默认)生长培养基：RPMI-1640＋10% FBS（AUS-01S）＋1%P/S

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%；温度：37℃

冻存条件：70% 基础培养基+20%FBS（AUS-01S）+10%DMSO

液氮保存

传代步骤：1.混匀细胞，收集细胞培养基，900rpm离心3-5min，弃上清。2.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里。3.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养。

传代比例（密度）：1:2-1:3（具体情况视细胞生长速度及密度决定）

换液频次：2-3次/周

培养注意事项：

部分悬浮细胞会附着瓶底，轻轻晃动培养基或者吹打细胞面就会脱落，不需要胰酶消化。建议使用培养皿培养，更适合吹打细胞操作，吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响细胞状态。

收货注意事项：

1.收到细胞后先不开瓶盖，请及时核对培养瓶上标注的细胞名称是否与订购的细胞名称一致以及培养瓶是否有破损或漏液异常情况。若没有发现漏液、污染等异常情况，

2.瓶身擦拭酒精后放在培养箱中静置1-2小时稳定细胞状态。镜下观察，有条件的情况下拍照，之后请尽快传代培养。如果当天无法操作，请常温(约25°)放置，第二天及时操作。

特殊情况：

1.若培养瓶或者冻存管出现破碎或漏液情况，及时拍照联系销售反馈，按指导进行进一步处理。若只是外包装破损一般不影响培养瓶和冻存管，请放心使用。

2.显微镜下观察细胞状态。先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。

3.请仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息（如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等)。

4.建议细胞培养传代时，定期拍照并记录细胞生长状态，所拍照将作为后续技术服务依据。

产品说明

基本信息

中文名称：人胃癌细胞

细胞简称：MKN-45

细胞别称：MKN-45; MKN 45

细胞形态：上皮细胞样

生长特性：圆形，贴壁和少量悬浮生长

培养方案A(默认)生长培养基：RPMI1640培养基＋10% FBS（CF-02S/AUS-01S）＋1%P/S

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%；温度：37℃

冻存条件：70% 基础培养基+20%FBS+10%DMSO

液氮保存

传代步骤：1.吸出原培养液；悬浮细胞离心处理；

2.加入2mL左右PBS，轻轻晃动培养瓶润洗细胞,吸出PBS丢弃；

3.加入1mL左右0.25%胰蛋白酶溶液（含EDTA），轻轻晃动培养瓶使之浸润所有细胞；

4.放入培养箱消化2-3min，显微镜下看到细胞块中间的细胞明显变圆有间隙时可终止，全程不要拍打培养瓶；

5.加入5mL含血清的培养基终止消化，吹打细胞使之脱壁并在液体里反复吹打使细胞尽量呈单颗细胞的悬浮液；

6.收集细胞悬液离心，1000rpm/min 3-5分钟，离心完吸出上清丢弃；

7.加入新鲜培养基，轻轻吹打混匀细胞即可，按比例接种到新培养瓶，补足培养基，拧松瓶盖或使用透气瓶盖进行培养。

传代比例（密度）：1:2-1:3

换液频次：2-3/周

 

收货注意事项：

1.收到细胞后先不开瓶盖，请及时核对培养瓶上标注的细胞名称是否与订购的细胞名称一致以及培养瓶是否有破损或漏液异常情况。若没有发现漏液、污染等异常情况，

2.瓶身擦拭酒精后放在培养箱中静置1-2小时稳定细胞状态。镜下观察，有条件的情况下拍照，之后请尽快传代培养。如果当天无法操作，请常温(约25°)放置，第二天及时操作。

培养注意事项：

1.悬浮部分离心收集(1000RPM,5分钟)，贴壁细胞部分消化2-3分钟处理。

特殊情况：

1.若培养瓶或者冻存管出现破碎或漏液情况，及时拍照联系销售反馈，按指导进行进一步处理。若只是外包装破损一般不影响培养瓶和冻存管，请放心使用。

2.显微镜下观察细胞状态。先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。

3.请仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息（如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等)。

4.建议细胞培养传代时，定期拍照并记录细胞生长状态，所拍照将作为后续技术服务依据。

产品说明

基本信息

中文名称：小鼠单核巨噬细胞白血病细胞

细胞简称：RAW 264.7

细胞别称：RAW264; RAW2647; RAW264.7; RAW-264.7; Raw 264.7; Raw264.7

细胞形态：单核细胞样

生长特性：贴壁细胞

培养方案A(默认)生长培养基：DMEM＋10% FBS（AUS-01S）＋1%P/S

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%；温度：37℃

冻存条件：70% 基础培养基+20%FBS+10%DMSO

液氮保存

传代步骤：1.吸出原培养液；

2.加入2mL左右PBS，轻轻晃动培养瓶润洗细胞,吸出PBS丢弃；

3.加入1mL左右0.25%胰蛋白酶溶液（含EDTA），轻轻晃动培养瓶使之浸润所有细胞；

4.放入培养箱消化，显微镜下看到细胞块中间的细胞明显变圆有间隙时可终止，全程不要拍打培养瓶；

5.加入5mL含血清的培养基终止消化，吹打细胞使之脱壁并在液体里反复吹打使细胞尽量呈单颗细胞的悬浮液；

6.收集细胞悬液离心，1000rpm/min 3-5分钟，离心完吸出上清丢弃；

7.加入新鲜培养基，轻轻吹打混匀细胞即可，按比例接种到新培养瓶，补足培养基，拧松瓶盖或使用透气瓶盖进行培养。

传代比例（密度）：1:3-1:6

换液频次：2-3/周

 

收货注意事项：

1.收到细胞后先不开瓶盖，请及时核对培养瓶上标注的细胞名称是否与订购的细胞名称一致以及培养瓶是否有破损或漏液异常情况。若没有发现漏液、污染等异常情况，

2.瓶身擦拭酒精后放在培养箱中静置1-2小时稳定细胞状态。镜下观察，有条件的情况下拍照，之后请尽快传代培养。如果当天无法操作，请常温(约25°)放置，第二天及时操作。

培养注意事项：

1.该细胞不建议使用胰酶消化，胰酶会刺激分化；2.超过3天不传代细胞容易分化；3.培养时存在少量分化细胞属于正常现象。

 

参考文献：

1. Ralph P, Nakoinz I. Antibody-dependent killing of erythrocyte and tumor targets by macrophage-related cell lines: enhancement by PPD and LPS. J. Immunol. 119: 950-954, 1977. PubMed: 894031.

2.Raschke WC, et al. Functional macrophage cell lines transformed by Abelson leukemia virus. Cell 15: 261-267, 1978. PubMed: 212198.

特殊情况：

1.若培养瓶或者冻存管出现破碎或漏液情况，及时拍照联系销售反馈，按指导进行进一步处理。若只是外包装破损一般不影响培养瓶和冻存管，请放心使用。

2.显微镜下观察细胞状态。先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。

3.请仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息（如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等)。

4.建议细胞培养传代时，定期拍照并记录细胞生长状态，所拍照将作为后续技术服务依据。

产品说明

基本信息

中文名称：小鼠胚胎成纤维细胞

细胞简称：3T3

细胞别称：NIH/3T3; NIH-3T3; NIH3T3; 3T3; 3T3NIH; 3T3-Swiss; Swiss-3T3; Swiss/3T3; Swiss 3T3; Swiss3T3

细胞形态：成纤维细胞样

生长特性：贴壁细胞

组织来源：胚胎

培养方案A(默认)生长培养基：DMEM培养基＋10% FBS（Cell-Box CF-02S/AUS-01S）＋1%P/S

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%；温度：37℃

冻存条件：70% 基础培养基+20%FBS+10%DMSO

液氮保存

传代步骤：1.吸出原培养液；

2.加入2mL左右PBS，轻轻晃动培养瓶润洗细胞,吸出PBS丢弃；

3.加入1mL左右0.25%胰蛋白酶溶液（含EDTA），轻轻晃动培养瓶使之浸润所有细胞；  

4.放入培养箱消化2-3 min，显微镜下看到细胞块中间的细胞明显变圆有间隙时可终止；

5.加入5mL含血清的培养基终止消化，吹打细胞使之脱壁并在液体里反复吹打使细胞尽量呈单颗细胞的悬浮液；

6.收集细胞悬液离心，1000rpm/min 3-5分钟，离心完吸出上清丢弃；

7.加入新鲜培养基，轻轻吹打混匀细胞即可，按比例接种到新培养瓶，补足培养基，拧松瓶盖或使用透气瓶盖进行培养。

传代比例（密度）：1:2-1:3

换液频次：2-3/周

 

收货注意事项：

收到细胞后先不开瓶盖，请及时核对培养瓶上标注的细胞名称是否与订购的细胞名称一致以及培养瓶是否有破损或漏液异常情况。若没有发现漏液、污染等异常情况，

 

瓶身擦拭酒精后放在培养箱中静置1-2小时稳定细胞状态。镜下观察，有条件的情况下拍照，之后请尽快传代培养。如果当天无法操作，请常温(约25°)放置，第二天及时操作。

参考文献：

1.Green H, Meuth M. An established pre-adipose cell line and its differentiation in culture. Cell 3: 127-133, 1974. PubMed: 4426090.

2.Green H. Triglyceride-accumulating clonal cell line. US Patent 4,003,789 dated Jan 18 1977.

特殊情况：

1.若培养瓶或者冻存管出现破碎或漏液情况，及时拍照联系销售反馈，按指导进行进一步处理。若只是外包装破损一般不影响培养瓶和冻存管，请放心使用。

2.显微镜下观察细胞状态。先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。

3.请仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息（如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等)。

4.建议细胞培养传代时，定期拍照并记录细胞生长状态，所拍照将作为后续技术服务依据。

产品说明

基本信息

中文名称：人葡萄膜黑色素瘤

细胞简称：92-1

细胞别称：92_1; 92.1; 921;

细胞形态：上皮细胞样

生长特性：贴壁细胞

组织来源：眼葡萄膜黑色素瘤

培养方案A(默认)生长培养基：RPMI1640培养基＋10% FBS（Cell-Box CF-02S/AUS-01S）＋1%P/S

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%；温度：37℃

冻存条件：70% 基础培养基+20%FBS+10%DMSO

液氮保存

传代步骤：1.吸出原培养液；

2.加入2mL左右PBS，轻轻晃动培养瓶润洗细胞,吸出PBS丢弃；

3.加入1mL左右0.25%胰蛋白酶溶液（含EDTA），轻轻晃动培养瓶使之浸润所有细胞；  

4.放入培养箱消化1-2 min，显微镜下看到细胞块中间的细胞明显变圆有间隙时可终止；

5.加入5mL含血清的培养基终止消化，吹打细胞使之脱壁并在液体里反复吹打使细胞尽量呈单颗细胞的悬浮液；

6.收集细胞悬液离心，1000rpm/min 3-5分钟，离心完吸出上清丢弃；

7.加入新鲜培养基，轻轻吹打混匀细胞即可，按比例接种到新培养瓶，补足培养基，拧松瓶盖或使用透气瓶盖进行培养。

传代比例（密度）：1:2-1:3

换液频次：2-3/周

 

收货注意事项：

收到细胞后先不开瓶盖，请及时核对培养瓶上标注的细胞名称是否与订购的细胞名称一致以及培养瓶是否有破损或漏液异常情况。若没有发现漏液、污染等异常情况，

 

瓶身擦拭酒精后放在培养箱中静置1-2小时稳定细胞状态。镜下观察，有条件的情况下拍照，之后请尽快传代培养。如果当天无法操作，请常温(约25°)放置，第二天及时操作。

特殊情况：

1.若培养瓶或者冻存管出现破碎或漏液情况，及时拍照联系销售反馈，按指导进行进一步处理。若只是外包装破损一般不影响培养瓶和冻存管，请放心使用。

2.显微镜下观察细胞状态。先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。

3.请仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息（如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等)。

4.建议细胞培养传代时，定期拍照并记录细胞生长状态，所拍照将作为后续技术服务依据。

产品说明

基本信息

中文名称：人非小细胞肺癌细胞

细胞简称：H1299

细胞别称：H1299; H-1299; NCIH1299;

细胞形态：上皮细胞样

生长特性：贴壁细胞

组织来源：肺；来源于转移部位:淋巴结

培养方案A(默认)生长培养基：DMEM＋10% FBS（Cell-Box CF-02S/AUS-01S）＋1%P/S

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%；温度：37℃

冻存条件：70% 基础培养基+20%FBS（Cell-Box CF-02S/AUS-01S）+10%DMSO

液氮保存

传代步骤：1.吸出原培养液；

2.加入2mL左右PBS，轻轻晃动培养瓶润洗细胞,吸出PBS丢弃；

3.加入1mL左右0.25%胰蛋白酶溶液（含EDTA），轻轻晃动培养瓶使之浸润所有细胞；  

4.放入培养箱消化2-3 min，显微镜下看到细胞块中间的细胞明显变圆有间隙时可终止；

5.加入5mL含血清的培养基终止消化，吹打细胞使之脱壁并在液体里反复吹打使细胞尽量呈单颗细胞的悬浮液；

6.收集细胞悬液离心，1000rpm/min 3-5分钟，离心完吸出上清丢弃；

7.加入新鲜培养基，轻轻吹打混匀细胞即可，按比例接种到新培养瓶，补足培养基，拧松瓶盖或使用透气瓶盖进行培养。

传代比例（密度）：1:3

换液频次：2-3/周

 

收货注意事项：

收到细胞后先不开瓶盖，请及时核对培养瓶上标注的细胞名称是否与订购的细胞名称一致以及培养瓶是否有破损或漏液异常情况。若没有发现漏液、污染等异常情况，

 

瓶身擦拭酒精后放在培养箱中静置1-2小时稳定细胞状态。镜下观察，有条件的情况下拍照，之后请尽快传代培养。如果当天无法操作，请常温(约25°)放置，第二天及时操作。

培养注意事项：

该细胞贴壁能力较弱，培养时可酌情使用预铺0.2%明胶的培养瓶/培养皿。细胞生长不能过密，过密后细胞容易成片脱落，脱落下来的细胞可以通过离心收集，使用0.05%Trypsin-0.53 mM EDTA消化后继续培养。

 

参考文献：1.Lung cancer shapes commensal bacteria via exosome-like nanoparticles(2022/03/17)。

特殊情况：

1.若培养瓶或者冻存管出现破碎或漏液情况，及时拍照联系销售反馈，按指导进行进一步处理。若只是外包装破损一般不影响培养瓶和冻存管，请放心使用。

2.显微镜下观察细胞状态。先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。

3.请仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息（如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等)。

4.建议细胞培养传代时，定期拍照并记录细胞生长状态，所拍照将作为后续技术服务依据。

产品说明

基本信息

中文名称：人脐静脉内皮细胞永生化

细胞简称：HUVEC

细胞形态：内皮细胞样

生长特性：贴壁细胞

培养方案A(默认)生长培养基：内皮细胞培养体系:基础培养基（ECM）500ml;生长添加剂（ECGS）5ml; 胎牛血清25ml;双抗5ml

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%；温度：37℃

冻存条件：70% 基础培养基+20% FBS +10%DMSO

液氮保存

传代步骤：

1.吸出原培养液；

2.加入2mL左右PBS，轻轻晃动培养瓶润洗细胞,吸出PBS丢弃；

3.加入1mL左右0.25%胰蛋白酶溶液（含EDTA），轻轻晃动培养瓶使之浸润所有细胞；

4.放入培养箱消化30-60s，显微镜下看到细胞块中间的细胞明显变圆有间隙时可终止，全程不要拍打培养瓶；

5.加入5mL含血清的培养基终止消化，吹打细胞使之脱壁并在液体里反复吹打使细胞尽量呈单颗细胞的悬浮液；

6.收集细胞悬液离心，1000rpm/min 3-5分钟，离心完吸出上清丢弃；

7.加入新鲜培养基，轻轻吹打混匀细胞即可，按比例接种到新培养瓶，补足培养基，拧松瓶盖或使用透气瓶盖进行培养。

传代比例（密度）：1:2

换液频次：每周2-3次

倍增时间：2-3次/周

备注：该细胞通过慢病毒转染的方式携带SV40基因。

收货注意事项：

1. 该细胞对胰酶比较敏感，消化时间不宜太长，避免对细胞造成损伤。

2. 该细胞对培养条件要求较高，需要及时更换内皮细胞专用培养基培养。

参考文献：

1. Biosynthesis of IL-8 and endothelin-1,2 by immortal simian virus 40 tsA-transformed human endothelial cells. Oncol Rep. 1996 Sep

特殊情况：

1.若培养瓶或者冻存管出现破碎或漏液情况，及时拍照联系销售反馈，按指导进行进一步处理。若只是外包装破损一般不影响培养瓶和冻存管，请放心使用。

2.显微镜下观察细胞状态。先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。

3.请仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息（如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等)。

4.建议细胞培养传代时，定期拍照并记录细胞生长状态，所拍照将作为后续技术服务依据。

产品说明

基本信息

中文名称：非洲绿猴肾细胞

细胞简称：Vero

细胞别称：VERO; Verda reno

细胞形态：上皮细胞样

生长特性：贴壁细胞

培养方案A(默认)生长培养基：DMEM＋10% FBS（Cell-Box CF-02S/AUS-01S）＋1%P/S

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%；温度：37℃

冻存条件：70% 基础培养基+20%FBS（Cell-Box CF-02S/AUS-01S）+10%DMSO

液氮保存

传代步骤：1.吸出原培养液；

2.加入2mL左右PBS，轻轻晃动培养瓶润洗细胞,吸出PBS丢弃；

3.加入1mL左右0.25%胰蛋白酶溶液（含EDTA），轻轻晃动培养瓶使之浸润所有细胞；

4.放入培养箱消化2-3min，显微镜下看到细胞块中间的细胞明显变圆有间隙时可终止；

5.加入5mL含血清的培养基终止消化，吹打细胞使之脱壁并在液体里反复吹打使细胞尽量呈单颗细胞的悬浮液；

6.收集细胞悬液离心，1000rpm/min 3-5分钟，离心完吸出上清丢弃；

7.加入新鲜培养基，轻轻吹打混匀细胞即可，按比例接种到新培养瓶，补足培养基，拧松瓶盖或使用透气瓶盖进行培养。

传代比例（密度）：1:3

换液频次：2-3/周

收货注意事项：

（1）收到细胞后先不开瓶盖，请及时核对培养瓶上标注的细胞名称是否与订购的细胞名称一致以及培养瓶是否有破损或漏液异常情况。若没有发现漏液、污染等异常情况，瓶身擦拭酒精后放在培养箱中静置1-2小时稳定细胞状态。镜下观察，有条件的情况下拍照，之后请尽快传代培养。如果当天无法操作，请常温(约25°)放置，第二天及时操作。

（2）收到细胞后若发现存在细胞脱落现象:请将培养瓶中所有培养液收集至离心管，离心(1000rpm，5min)，弃上清，加1ml的0.25%胰酶于离心管中，轻轻吹打，重悬，作用2-3分钟后，加3-6ml完全培养基中止反应。再离心，去上清，加1-3ml完全培养基重悬。仍然贴壁的细胞，按照以上描述的常规方法加入胰酶消化。最后将消化好的脱落细胞和贴壁细胞混合，按比例接种到新的T25培养瓶中即可。

 

培养注意事项：

不同胰酶品牌消化时间不同，注意控制胰酶消化时间，避免消化过长或过短导致细胞状态不佳。

 

参考文献：

1.British Pharmacopoeia Commission Tests for microbial contamination. London, UK:British Pharmacopoeia Commission;British Pharmacopoeia Appendix XVI B, 2003 Didier ES, et al.

2.Characterization of Encephalitozoon (Septata) intestinailis isolates cultured from nasal mucosa and bronchoalveolar lavage fluids of two AIDS patients. J. Eukaryot. Microbiol. 43: 34-43, 1996.

 

特殊情况：

1.若培养瓶或者冻存管出现破碎或漏液情况，及时拍照联系销售反馈，按指导进行进一步处理。若只是外包装破损一般不影响培养瓶和冻存管，请放心使用。

2.显微镜下观察细胞状态。先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。

3.请仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息（如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等)。

4.建议细胞培养传代时，定期拍照并记录细胞生长状态，所拍照将作为后续技术服务依据。

产品说明

基本信息

中文名称：人胚肾细胞

细胞简称：293T

细胞别称：Hek293T; HEK-293T; HEK 293T; HEK-293-T； Human Embryonic Kidney 293T;

细胞形态：上皮细胞样

生长特性：贴壁细胞

培养方案A(默认)生长培养基：DMEM＋10% FBS（Cell-Box CF-01S/CF-01P/AUS-01S）＋1%P/S

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%；温度：37℃

冻存条件：70% 基础培养基+20%FBS（Cell-Box CF-01S/CF-01P/AUS-01S）+10%DMSO

液氮保存

传代步骤：1.吸出原培养液；

2.加入2mL左右PBS，轻轻晃动培养瓶润洗细胞,吸出PBS丢弃；

3.加入1mL左右0.25%胰蛋白酶溶液（含EDTA），轻轻晃动培养瓶使之浸润所有细胞；  

4.放入培养箱消化2-3 min，显微镜下看到细胞块中间的细胞明显变圆有间隙时可终止；

5.加入5mL含血清的培养基终止消化，吹打细胞使之脱壁并在液体里反复吹打使细胞尽量呈单颗细胞的悬浮液；

6.收集细胞悬液离心，1000rpm/min 3-5分钟，离心完吸出上清丢弃；

7.加入新鲜培养基，轻轻吹打混匀细胞即可，按比例接种到新培养瓶，补足培养基，拧松瓶盖或使用透气瓶盖进行培养。

传代比例（密度）：1:3

换液频次：2-3/周

 

收货注意事项：

（1）收到细胞后先不开瓶盖，请及时核对培养瓶上标注的细胞名称是否与订购的细胞名称一致以及培养瓶是否有破损或漏液异常情况。若没有发现漏液、污染等异常情况，瓶身擦拭酒精后放在培养箱中静置1-2小时稳定细胞状态。镜下观察，有条件的情况下拍照，之后请尽快传代培养。如果当天无法操作，请常温(约25°)放置，第二天及时操作。

（2）收到细胞后若发现存在细胞脱落现象:请将培养瓶中所有培养液收集至离心管，离心(1000rpm，5min)，弃上清，加1ml的0.25%胰酶于离心管中，轻轻吹打，重悬，作用2-3分钟后，加3-6ml完全培养基中止反应。再离心，去上清，加1-3ml完全培养基重悬。仍然贴壁的细胞，按照以上描述的常规方法加入胰酶消化。最后将消化好的脱落细胞和贴壁细胞混合，按比例接种到新的T25培养瓶中即可。

培养注意事项：

该细胞贴壁能力较弱，培养时可酌情使用预铺0.2%明胶的培养瓶/培养皿。细胞生长不能过密，过密后细胞容易成片脱落，脱落下来的细胞可以通过离心收集，使用0.05%Trypsin-0.53 mM EDTA消化后继续培养。