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1.一旦您在细胞培养的过程中发现有黑点生成,首先,要肉眼观察培养基是否混浊,然后,在镜下观察培养细胞生长的状态,黑点是否游动。如果细胞被污染,微生物则会大量繁殖,培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。如果在镜下观察细胞,生长状态良好,与黑点出现前相比,没有任何变化,那么,黑点的出现可能与以下几种情况有关:
(1)细胞生长过老,破碎的细胞残骸;
(2)配制培养基的 pH 值偏高,不宜细胞生长;
(3)培养原代细胞中出现小黑点,可能是原代组织中的杂质,多次传代可以消除;
(4)血清等级不足以维持细胞良好的生长,更换高等级的胎牛血清。