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1.胎牛血清在完全解冻后,进行轻微摇匀,放置56℃温水浴中30分钟即可灭活。在灭活过程中建议有规律的摇匀,使瓶内血清受热均衡。也可使用无菌的小量容器将血清分装后,再进行热灭活,但需要注意在分装和热灭活过程中防止污染。
2.加热可以灭活补体系统,激活的补体可以刺激平滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,激活淋巴细胞和巨噬细胞。用户可以根据自己的研究要求,决定是否对血清进行热灭活。
3.若非必须,可以不需要做热处理这一步。有实验显示,经过正确热灭活处理的血清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而且经过热处理的血清,沉淀物的形成会显著的增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是“小黑点”,常常会让研究者误以为是血清遭受污染。热灭活过程操作不当,例如血清瓶中只有局部温度过高,摇晃不均匀,灭活时间过长,控温不稳定等因素,都会造成血清品质下降。若非必须,可以不需要做热处理这一步。不但节省时间,更确保血清的质量!