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MTT溶液（5 mg/mL）

  • MTT溶液（5 mg/mL）
      MTT溶液（5 mg/mL）
      目录号 规格 单价
      CBSJ-M0012 10mL 200.00元

      产品说明

      基本信息

      产品名称：MTT溶液（5 mg/mL）

      货号：CBSJ-M0012

      规格：10ml

      简介：MTT全称为3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-dipHenyl-2-H-tetrazolium bromide，汉语化学名为 3-（4，5-二甲基噻唑-2）-2，5-二苯基四氮唑溴盐，商品名：噻唑蓝，是一种黄颜色的染料。MTT能够检测细胞存活和生长，其检测原理为：活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶，能使外源性MTT还原为不溶于水的蓝紫色结晶物--甲瓒（Formazan），并沉积在细胞中，而死细胞则无此功能；二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的甲瓒，用酶标仪在490nm或570nm波长处（常用490nm）测定其光吸收值（OD值），通过OD值的大小，可以判断活细胞的数量或活性，在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与活细胞的数量或活性成正比。该方法的特点是灵敏度高，并且十分经济，已广泛应用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。

      产品形态：液体

      产品浓度：5 mg/mL

      产品规格：10 mL

      溶剂：10 mM PBS

      内毒素：< 1 EU/mL

      储存条件：-20℃，避光储存

      保质期：18个月

      操作步骤（仅供参考）：

      1、细胞用含血清的培养液培养至对数生长期，常规胰蛋白酶消化液消化细胞（悬浮细胞无需消化）。

      2、低速离心，收集细胞沉淀。

      3、用培养液重悬细胞沉淀，制备成单细胞悬液，并计数。

      4、 细胞接种于96孔培养板，一般接种密度为3000～10000 /孔。通常细胞增殖实验每孔加3000个细胞，细胞毒性实验每孔加入6000个细胞即可。具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定。

      5、37℃ 5% CO2继续培养或按照实验具体需要进行培养，一般培养6～24h。

      6、按照实验具体要求，给予0～20ul干预药物处理，37℃ 5% CO2继续培养至合适时间。

      7、弃培养液，每孔加入10ul MTT solution和100ul新鲜培养液，在细胞培养箱内继续孵育4h。

      8、弃培养液，每孔加入100ul DMSO，置摇床上低速振荡10min，使结晶物充分溶解。如果紫色结晶较小或较少，溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大或较多，溶解的时间会长一些。

      9、在酶联免疫检测仪570 nm测定各孔吸光度。

      注意事项：

      1、本产品经0.22 μm过滤除菌，使用本产品时应注意无菌操作，避免污染。

      2、MTT溶液为黄色溶液，见光易分解，操作时应避光，当MTT溶液颜色变为灰绿色时，请勿使用。

      3、MTT溶液在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固，可以在20-25℃水浴中温育片刻至全部融解混匀后使用。

      4、使用MTT时应先混匀，不宜长时间放置于室温环境；2-8℃避光保存时，一个月内有效；切忌反复冻融，用量较少时建议分装冻存。

      5、MTT对菌很敏感，培养细胞时避免污染。

      6、MTT有致癌性，应做好防护工作。

      7、由于使用96孔板进行检测，如果细胞培养时间较长，应注意蒸发问题。

      8、应注意设立调零孔和对照孔。

      9、本产品仅用于科研或进一步研究使用，不可用于诊断和治疗。

      适用范围：

      特点：

      保存：

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